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366nm大腸埃希氏菌測定熒光觀察儀使用方法

日期：2025-07-20 16:23

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摘要： 366nm檢測用紫外燈, 用于水及食物中的微生物檢測，如水中大腸埃希氏菌在含MUG 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，即會產(chǎn)生熒光反應(yīng)也可用于實驗室蛋白質(zhì)及化合物的檢測。大腸埃希氏菌定義大腸埃希氏菌是指能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培養(yǎng)液呈黃色，能產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的**。檢測重要性《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》GB/T 5750-2006中...

366nm檢測用紫外燈, 用于水及食物中的微生物檢測，如水中大腸埃希氏菌在含MUG 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，即會產(chǎn)生熒光反應(yīng)也可用于實驗室蛋白質(zhì)及化合物的檢測。

大腸埃希氏菌定義
大腸埃希氏菌是指能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培養(yǎng)液呈黃色，能產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的**。

檢測重要性

《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》GB/T 5750-2006中將大腸埃希氏菌列入檢測項目中。并在解讀《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB5749-2006中闡述：“只有埃希氏大腸桿菌是糞源特異性的，是準(zhǔn)確和專的糞便污染指示”。

、用途：

大腸埃希氏菌測定熒光觀察使用方法：將臺式紫外光燈置于暗處，插上電源，將經(jīng)過24小時培養(yǎng)后的EC-MUG管在燈下照射，如有藍色熒光產(chǎn)生則為大腸埃希氏菌陽性管；

三、注意事項：

每次觀察時，用個沒開封的EC-MUG管和被測的EC-MUG管在紫外光燈同時觀察，如果被測的EC-MUG管產(chǎn)生熒光，在紫外光燈下與沒開封的EC-MUG管比較，有明顯的區(qū)別。每次測試完后將電源拔掉。

四、具體方法:取供試液10ml(相當(dāng)于供試品1g、1ml）,直接或處理后接種至適量(不少于100ml)的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中,培養(yǎng)18--24小時,必要時可延長至48小時.
取上述培養(yǎng)物0.2ml,接種至含5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi),培養(yǎng),于5小時、24小時在366nm紫外線下觀察,同時用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對照.若管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)熒光,為MUG陽性,不呈現(xiàn)熒光,為MUG陰性.觀察后,沿培養(yǎng)管的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液,液面呈玫瑰紅色,為靛基質(zhì)陽性,呈試劑本色,為靛基持陰性.本底對照應(yīng)為MUG陰性和靛基質(zhì)陰性.

如MUG陽性,靛基質(zhì)陽性,判供試品檢出大腸埃希菌;

如MUG陰性,靛基質(zhì)陰性,判供試品未檢出大腸埃希菌;如MUG陽性,靛基質(zhì)陰性,或MUG陰性,靛基質(zhì)陽性,則應(yīng)取膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上,培養(yǎng)18--24小時.

若平板上無菌落生長,或生長的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征不符,判供試品未檢出大腸埃希菌.若平板上生長的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似,應(yīng)進行分離,純化,染色鏡檢和適宜的生化試驗,確認(rèn)是否為大腸埃希菌.

大腸菌形態(tài)特征
曙紅亞甲藍:呈紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色,菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心,圓形,稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤

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